Lingkungan dan kondisi fisiologis yang mempengaruhi Tetrahymena sp. infeksi pada guppies, Poecilia reticulate Peters
M Pimenta Leibowitz1, R Ariav2 dan D Zilberg3
• Hazeva Pusat Penelitian dan Pengembangan, Yakub Blaustein Lembaga Penelitian Gurun, Ben-Gurion Universitas Negev, Boqer Kampus Sede, Israel
• Aquavet Technologies, Yaacov Zichron, Israel
• Yakub Blaustein Lembaga Penelitian Gurun, Ben-Gurion University of merebut, Kampus Boqer Sede, Israel
Abstrak
Infeksi parasit yang disebabkan oleh Tetrahymena sp. Merupakan masalah serius di guppies, Poecilia reticulata. Tetrahymena diisolasi dari lesi kulit guppy yang terinfeksi secara alami dalam budidaya komersial pertanian, kultur in vitro dan digunakan dalam
eksperimental infeksi berikutnya. Selain guppies, angelfish, Pterophyllum scalare, platyfish, Xiphophorus maculates, dan neontetra, Paracheirodon innesi, adalah rentan, sedangkan nila (Oreochromis niloticus • O. aureus) adalah resisten. Ciliata memiliki afinitas yang tinggi
terhadap kematian ikan. Abrasi kulit tidak mempengaruhi infeksi, tetapi ikan dengan penyakit gelembung gas memiliki dampak infeksi jauh lebih tinggi daripada ikan non infeksi. Infeksi secara signifikan lebih tinggi saat ikan terkena tingkat beban amonia yang tinggi, organik tinggi
dan suhu air rendah. Dalam kondisi pengiriman, infeksi meningkat secara signifikan. Pemulihan penuh dicapai pada kepadatan ikan rendah. Hasil menunjukkan bahwa lingkungan miskin dan fisiologis meningkatkan kondisi infeksi dengan Tetrahymena sp.
Kata kunci: Ciliata, ikan, Guppy, infeksi, pemulihan, Tetrahymena.
Pendahuluan
Guppy, Poecilia reticulata Peters, adalah salah satu spesies ikan hias yang paling populer dan diperdagangkan secara luas di seluruh dunia. Di Singapura, jumlah ekspor tahunan guppies dicatat sebesar $ 13 juta, hampir 15% dari total ekspor ikan hias pada tahun 1996
(Loo, Ling & Lim 1998). Di Israel, produksi ikan hias tropis adalah industri dengan nilai pertumbuhan diperkiraan sebesar 2,7 juta Euro di Tahun 2004 dan guppies mewakili sekitar 70% ikan dihasilkan (O. Carmeli, Agrexco Carmel, Komunikasi Perorangan).
Para protozoa mata berbulu, Tetrahymena sp., adalah penyebab utama penyakit Yang mempengaruhi guppies terutama agen dan umumnya dikenal sebagai 'guppykiller
parasit '. Genus Tetrahymena mencakup terutama yang hidup bebas holotrichous, umumnya saprozoic siliata, yang memakan bahan organik dan bakteri di habitat alam, dan juga dianggap menginfeksi ikan yang ditekankan oleh kondisi lingkungan yang merugikan (Lom, 1995). Ikan yang terinfeksi lesu dan biasanya ditandai dengan lesi putih pada permukaan tubuh dan sirip terkikis (Imai, Tsurimaki, Goto, Wakita & 2000 Hatai; Chukanhom Hatai,, Lawhavinit, Hanjavanit, Kunitsune & 2001 Imai; Shenberg 2003). Selain guppies, spesies lain telah dilaporkan rentan terhadap parasit ini. Ferguson, Hicks, Lynn, Ostland & Bailey (1987) melaporkan Ulkus tengkorak salmon Atlantik, Salmo salar L., terkait dengan Tetrahymena sp. Tinggi kematian di laboratorium-ikan zebra dipertahankan, Danio rerio (Hamilton), telah dikaitkan dengan parasit (Astrofsky, Schech, Sheppard, Obenschain, Chin, Kacergis, Laver, Bartholomew & Fox 2002). Pada infeksi eksperimental, pristella, Pristella maxillaries (Ulrey), neontetra, Paracheirodon innesi (Myers), dan cherry barbs, Puntius titteya Diraniyagala, rentan terhadap infeksi dengan Tetrahymena pyriformis (Ponpornpisit, Endo & Murata 2000). Konvensional perawatan terhadap infeksi protozoa yang efektif terhadap dangkal, tetapi tidak
infeksi sistemik dengan Tetrahymena sp. Ponpornpisit, Endo & Murata (2001) melaporkan bahwa gabungan aplikasi immuno-stimulan dan garam mandi penyakit diobati secara efektif.
Infeksi dengan Tetrahymena sp. Merupakan masalah yang serius dalam produksi Guppy di Thailand (Ponpornpisit et al. 2000; Hatai et al. 2001). Sebuah parah infeksi sistemik di sebuah peternakan komersial di selatan Israel (I. Paperna, Universitas Ibrani
Yerusalem, komunikasi pribadi) yang dipimpinnya kering. Dalam studi ini, infeksi dan pemulihan Tetrahymena sp. yang belajar di bawah berbeda kondisi, menggunakan isolat yang diperoleh dari terinfeksi guppies di sebuah peternakan komersial. Sensitivitas jenis ikan lainnya juga dievaluasi.
Bahan dan metode
Ikan
Guppies, panjang 2,3-2,8 cm, diperoleh dari budidaya pertanian komersial di Lembah Arava, Israel. Setibanya di laboratorium, mereka diperiksa untuk menentukan bahwa mereka yang jelas tentang Tetrahymena sp. dan disimpan di dalam sebuah tangki L 130. Lain diuji spesies, termasuk ikan nila (hibrida Oreochromis• aureus O. niloticus) 2,3-2,5 cm, angelfish, Pterophyllum scalare (Lichtenstein), 2,2-2,3 cm panjang, platyfish, Xiphophorus maculates (Gunther), 2,5-2,6 cm panjang dan neontetra, Paracheirodon innesi (Myers) 2,1-2,3 cm, juga diperoleh dari pertanian komersial di Tanah Negeb dan disimpan dalam 30 – L akuarium. Tank holding dan wadah disediakan dengan filter biologis dan dibersihkan mingguan
menyedot dan mengganti setengah dari air dengan dechlorinated air segar, yang diperoleh dengan menggunakan 50 mg L) 1 natrium tiosulfat pentahydrate (Willam Blythe, Accrington, Inggris).
Spesies ikan hias diberi makan sekali sehari dengan makanan komersial ikan hias (Tropical Orange, Tzemah, Israel) dan ikan diberi makan makanan komersial nila (Diet Nomor 15, Pabrik Miluot, R.M.C Ltd, Zvi Ramat, Israel). Fotoperiodik itu ditetapkan pada 12:12 cahaya h: siklus gelap dan suhu tetap di 24 1 C. oksigen terlarut diukur dengan sebuah YSI 52 meter oksigen terlarut (YSI Inc, Kuning Springs, OH, USA) dan pH diukur dengan pH meter (EUTECH Instruments, Ayer Rajah Crescent, Singapura). Amonia dan nitrit adalah diukur dengan menggunakan kit kolorimetri (Merck, Darmstadt, Jerman). Oksigen tingkat dipertahankan di atas 8 mg L) 1, pH 7.6 dan amonia dan Konsentrasi nitrit disimpan di bawah 0,5 mg L-1.
Karakterisasi morfologi Tetrahymena sp.
Tetrahymena sp. dari ikan terinfeksi dan dari kultur in vitro dan diamati di bawah mikroskop cahaya dalam basah mount. Lebih lanjut karakterisasi morfologi, termasuk ukuran pengukuran, analisis yang ciliature dan aparat bukal, dan pewarnaan perak menggunakan Klein dan Chatton-Lwoff prosedur (Foissner 1991), dilakukan pada organisme yang dibudidayakan. Pewarnaan Hematoksilin (Botes, Basson & Van As 2001) digunakan untuk mengungkapkan aparat nuklir.
Isolasi dan pemeliharaan Tetrahymena sp. in vitro
Ikan yang terinfeksi dengan Tetrahymena sp. Diperoleh dari sebuah peternakan komersial di Israel utara. Ikan yang lesu, ditampilkan karakteristik kulit keputihan lesi dan sirip terkikis, dan parasit itu diamati pada kulit dan sirip bawah cahaya mikroskop. Tetrahymena sp. dari lesi kulit dipindahkan ke medium ATCC 357 (ATCC, Manassas, VA, Amerika Serikat) dengan penisilin G (3 mg L) -1) dan streptomisin sulfat (3 mg L) 1) dalam cawan petri dan diinkubasi di 25 C. Subkultur mingguan dilakukan dengan mentransfer 200 25 µ mL segar menengah. Sebuah Tetrahymena axenic sp. Budaya (Bagian angka 2 hingga 4) diperoleh dalam 2-4 minggu. Para siliata telah dialihkan kepada sel 24-baik budaya cluster (Corning Incorporated, Corning, NY, USA) dan subkultur mingguan mentransfer 10-30 Februari µ mL ATCC steril 357 medium kultur tanpa antibiotik. Tetrahymena sp. mencapai kepadatan sekitar 35 000 siliata mL) 1 setelah 1 minggu, sebagaimana ditentukan dengan menghitung dengan haemocytometer (Neubauer Perbaikan, Merek Ltd, Marienfeld, Jerman). Subkultur dilakukan dalam kondisi steril di biologi kap (ADS Laminar, CEDEX, Perancis).
Kondisi Eksperimental
Semua percobaan dilakukan dengan guppies kecuali dinyatakan secara khusus. Percobaan dilakukan di akuarium 7-L diisi sampai 6 L, 1-L gelas penuh 800 mL, atau cawan Petri diisi dengan 40 mL (sebagaimana ditentukan untuk setiap percobaan), dalam tiga hingga enam ulangan di 25 C, dengan menggunakan Tetrahymena sp. in vitro-berbudaya. Tidak biofiltrasi ditambahkan dan ikan tidak diberi makan selama sidang (2-5 hari), kecuali dinyatakan lain. Aquaria dan gelas yang diaerasi dengan batu udara. Dalam gelas, batu udara ditempatkan sekitar 5 cm di bawah tingkat air dan aerasi harus cukup lembut untuk menghindari aduk berlebihan. Parameter kualitas air (termasuk amonia, nitrit dan tingkat oksigen) adalah diukur pada akhir percobaan. Tambahan parameter kualitas air, termasuk oksigen kimia permintaan (COD), total padatan tersuspensi (TSS) kekeruhan dan, yang dianalisis dalam percobaan memeriksa efek materi organik pada infeksi. Semua analisis dilakukan sesuai dengan standar metode untuk pemeriksaan air dan air limbah (APHA 1995).
Pemeriksaan infeksi
Goresan kulit dari sekitar 1 cm2 yang lembut dikumpulkan dari sisi kiri lateral ikan menggunakan gelas cover-slip, dan diperiksa di bawah mikroskop cahaya atas kehadiran sp Tetrahymena bergerak lambat., vakuola makanan yang mengandung pigmen (Gambar 1a). Ini fitur menunjukkan bahwa Tetrahymena sp. telah memakan sel-sel pigmen inang, dan oleh karena itu mewakili bentuk parasit (Ponpornpisit et al. 2000). Infeksi dianggap hanya dalam ikan hidup.
Kerentanan spesies ikan yang berbeda
Kerentanan ikan nila, platyfish, angelfish dan neontetra untuk Tetrahymena sp. telah diuji dan dibandingkan dengan guppies. Ikan didedahkan untuk Tetrahymena sp. selama 24 jam, pada konsentrasi 10 000 mL siliata) 1 dalam cawan Petri 40-mL, dengan dan tanpa lembut dimakankan pada unggas seluas sekitar 1 cm2 kulit ikan 10 kali dengan sisi tumpul dar pisau bedah pisau. Untuk angelfish, 1-L dengan gelas penuh 60 mL air yang digunakan. Eksperimen dilakukan dalam rangkap tiga, dengan tiga ikan / ulangan. Ikan diperiksa untuk infeksi setelah 24 jam dan Mortalitas dicatat.
Pengaruh berbagai faktor infeksi
Pengaruh dari faktor yang berbeda, termasuk fisiologis, lingkungan dan lain eksternal parameter, pada kesuksesan infeksi diuji (Tabel 2). Dalam semua perawatan, ikan yang terkena siliata 100 mL) 1 dalam gelas 800-mL selama 48 jam dan diperiksa setiap hari selama infeksi, kecuali dinyatakan lain. Yang diuji kondisi dipertahankan di seluruh percobaan. Ikan kepadatan dan jumlah ulangan yang dirinci dalam Tabel 2.
Kulit cedera
Penyakit gelembung gas (GBD) Ikan didiagnosis dengan GBD oleh pengamatan gas emboli pada sirip dan insang bawah mikroskop cahaya, yang didatangkan dari sebuah peternakan komersial dan segera digunakan dalam infeksi eksperimental. Kelompok kontro terdiri dari ikan dari kami memegang kontainer.
Gambar 1: Tampilan ventral Tetrahymena sp. (Vakuola makanan) Dari gesekan kulit Guppy hidup menunjukkan mengandung pigmen (bar ¼ lm 40). (B) Dalam sp Tetrahymena vitro-berbudaya. (Perak Klein noda, bar 16 ¼ lm).
Amonia
Ikan yang terkena Ciliata pada 0, 1-2 dan 4-5 mg / g amonia. Sebuah konsentrasi 0 mg / g amonia diperoleh dengan menambahkan L 0,66 mL) 1 dari amonia detoxifier mengandung 2,05 m natrium hydroxymethanesulphonate (HOCH2SO3 Na) (Kordon Divisi Novalek Inc, Hayward, CA, USA). Untuk mendapatkan konsentrasi 4-5 mg / g amonia, solusi stok yang mengandung 10 mg / g dari NHþ4 ditambahkan pada konsentrasi L 1,25 mL) 1 (1 mL dalam 0,8 L). Sebuah konsentrasi 1-2 mg / g amonia dicapai oleh ammonia diekskresikan oleh ikan.
Suhu air
Ikan yang terkena Ciliata pada 16-17, 24-25 dan suhu 30-310 C. Suhu yang diatur dengan AC memberikan suhu kamar 18 C. Untuk mendapatkan suhu yang lebih tinggi 24-25 dan suhu 30-310 C, gelas yang tenggelam dalam wadah 100-L disertakan dengan pemanas akuarium (Guandong Risheng Group Co Ltd, Shenzhen, Cina).
Fotoperiodik
Ikan yang terkena Ciliata di kegelapan konstan dan dalam siklus: 12:12 h cahaya gelap.
Kedalaman air
Ikan yang terkena Ciliata pada volume air dan dalam wadah yang berbeda-ukuran: 1-L
gelas diisi dengan 800 ml air memberikan Kedalaman Air 11 cm dan akuarium 30 L diisi dengan volume yang sama memberikan kedalaman air 0,9 cm.
Bahan Organik
Lumpur dikumpulkan dari dua terendam biologis filter (4 L masing-masing), diambil dari tangki 130 L yang diisi dengan 50 ikan dengan berat 15-20 g masing-masing. COD, TSS dan kekeruhan dari nilai-nilai suspensi obyek aslinya organik adalah: 1.721,6 870,0 dan 444,0 mg L) 1, masing- masing. Suspensi ditambahkan pada 1% dan 10% (v / v) ke gelas tapi tidak terhadap perlakuan kontrol. COD, TSS dan tingkat kekeruhan diukur setelah 48 h.
Kondisi Pengiriman
Ikan yang terkena Ciliata dalam kantong polythene (29 ° 42 cm) diisi dengan 800 mL air, 0,66 mL L) 1 larutan Amquel, 2 L murni oksigen dan disegel (menurut prosedur yang biasa untuk pengiriman ikan hias). Untuk kontrol, 1-L gelas yang diisi dengan 800 mL air, 0,66 mL L) 1 larutan Amquel dan disuplai dengan aerasi. Kedua perlakuan tersebut ditempatkan dalam ditutup kotak styrofoam seluruh percobaan, seperti dalam prosedur pengiriman. Ikan diperiksa infeksi setelah 48 h.
Pemulihan singkat dari infeksi
Pemulihan ikan dari infeksi dengan Tetrahymena sp. diperiksa dalam berbagai ukuran dan berbentuk kontainer. Nai ve ikan terinfeksi dengan Tetrahymena sp. oleh paparan siliata 1000 mL) 1 selama 24 jam, dalam cawan Petri 40-mL, tiga ikan per piring, sebuah protokol infeksi yang dihasilkan 100%. ikan yang terinfeksi adalah menggenang dalam wadah 1-L dan delapan ikan sampel secara acak dan diperiksa untuk memverifikasi infeksi sukses. Ikan kemudian dibagi ke dalam berbagai ukuran kontainer di kepadatan ikan yang berbeda di dua terpisah percobaan (1 dan 2) sebagaimana tercantum dalam Tabel 4, dan diperiksa untuk infeksi setelah 1 minggu.
Analisis Statistik
Semua analisa statistik dilakukan dengan Sigma Stat (SPSS Inc, Chicago, IL, USA, 1992-1997) dan SPSS SPSS (Inc, 1989-1999). prevalensi yang infeksi dibandingkan dengan ANOVA satu arah. Pemulihan dari infeksi dianalisis dengan ANOVA pada peringkat (Tukey). Non-numerik parameter (persentase infeksi atau kematian) telah berubah (Arcsin x) untuk analisis statistik. Perbedaan itu dianggap signifikan pada P <0,05 atau sebagaimana lain.
Hasil
Karakteristik morfologi Tetrahymena sp.
Ciliata itu bulat untuk pyriform, rata-rata 41,7 4,29 21,7 2,48 Â • lm dalam ukuran (n ¼ Â 50), dengan ujung anterior menyempit. Masing-masing memiliki 25 Ciliata silia baris dan dua baris silia pasca-oral, merata spasi (Gbr. 1b). Sebuah macronucleus bola dengan berdiameter sekitar 6 lm adalah pusat diposisikan dan mikronukleus. Rongga itu terdiri dari tiga membranelles lisan pada kiri dan membrane bergelombang di sebelah kanan sisi rongga mulut. Ciliata tidak menampilkan ekor silia. Pergerakan Ciliata dalam air, seperti yang diamati di bawah mikroskop cahaya, mirip sepak bola spiral. Kerentanan spesies ikan yang berbeda untuk Tetrahymena sp.
Abraded Untreated
Control Exposed Control Exposed
Fish Infec. Mort. Infec. Mort. Infec. Mort. Infec. Mort.
Guppy 0 0 100 0 0 0 100 0
Tilapia 0 0 0 33.3 0 22.2 0 11.1
Angelfish 0 11.1 85.7 22.2 0 0 100 11.1
Platyfish 0 0 77.7 0 0 0 71.4 22.2
Neontetra 0 0 83.3 22.2 ND ND ND ND
Suseptibilitas dari spesies ikan yang berbeda disajikan pada Tabel 1. Prevalensi infeksi dan kematian relatif sama (P> 0,05) untuk guppi, angelfish, platyfish dan neontetra. Tilapia tidak terinfeksi oleh parasit. Abrasi kulit tidak mempengaruhi infeksi di salah satu spesies (P> 0,05). Ikan mati dari segala jenis , termasuk nila, secara konsisten dijajah oleh parasit.
Pengaruh faktor-faktor yang berbeda pada infeksi
Parameter kualitas air adalah hal serupa pada berbagai percobaan, kecuali di tempat menguji efek amonia dan bahan organik. Pada 48 jam, amonia dan tingkat nitrit adalah 1,0-2,0 dan 0,2-0,5 mg L) 1, dan kadar oksigen 7,5-8,5 mg L) 1. Prevalensi infeksi dibawah yang berbeda lingkungan dan kondisi fisiologis yang dirangkum pada Tabel 2. Kulit dimakankan pada unggas dan tidak mempengaruhi prevalensi infeksi pada 24 atau 48 jam, Infeksi meningkat secara signifikan antara 24 dan 48 jam. GBD memiliki signifikan yang berpengaruh terhadap prevalensi infeksi. Infeksi pada kedua perlakuan mengalami peningkatan signifikan antara 24 dan 48 jam dan perbedaan antara perawatan bertahan. Amonia memiliki pengaruh signifikan terhadap prevalensi infeksi. Pada 24 jam, infeksi secara signifikan lebih tinggi dalam gelas dengan 1,0-2,0 dan 4,0-5,0 mg / g ammonia. Infeksi tidak berubah secara signifikan pada 48 jam dan perbedaan antara perawatan bertahan.
Peningkatan bahan organik secara signifikan mempengaruhi prevalensi infeksi dan terjadi pada 48 jam. Ada peningkatan yang signifika antara 24 dan 48 jam pada semua perlakuan. Penambahan bahan organik berpengaruh nyata terhadap kualitas air (Tabel 3), yang tercermin dari COD tinggi tingkat per liter pada perawatan dengan 1% dan 10% bahan organik. TSS signifikan lebih tinggi dalam hal perlakuan 10% organik.
Meskipun signifikan berbeda, 1 dan 10% perawatan bahan organik lebih tinggi kekeruhan dibandingkan kontrol.
Suhu memiliki dampak yang signifikan terhadap prevalensi infeksi hanya pada 48 jam. Ikan terkena parasit pada suhu 16-17 C. Infeksi lebih tinggi terjadi pada suhu 24-25 dan 30-31 C. Infeksi secara signifikan meningkat antara 24 dan 48 jam pada suhu rendah (16-17 C).
Fotoperiodik berpengaruh nyata terhadap infeksi. Infeksi lebih rendah pada ikan disimpan di ruangan yang terang, dibandingkan dengan ikan yang disimpan di dalam ruangan yang gelap. Infeksi meningkat secara signifikan
antara 24 dan 48 jam di kedua perawatan. Pencahayaan untuk parasit pada kedalaman air sebesar 0,9 dan 11 cm tidak berpengaruh terhadap prevalensi infeksi.
Kondisi Pengiriman secara signifikan mempengaruhi prevalensi infeksi. Tingkat oksigen secara signifikan lebih tinggi dalam pengiriman dari pada control (14,4 mg L) 1 vs 8,4 mg L) 1 dan pH secara signifikan lebih rendah (6,6 vs 7,2. Parameter kualitas air lainnya yang serupa didua perlakuan, dengan 0 mg L) 1 amonia dan nitrit.
Pemulihan secara sepontan dari infeksi
Container sizes Fish densities(fish L)1) Replicates Recovery (%)
Trial 1
7-L aquarium 2.9 3 100a
800-mL beaker 12.5 3 69.2b
40-mL Petri dish 75 5 28.6c
Trial 2
800-mL beaker 2.5 10 75a
10 5 62.2ab
40 3 53.7bc
40-mL Petri dish 25 15 26.7bc
75 6 6.7c
Hasil dari percobaan pemulihan diringkas dalam Tabel 4. Penyembuhan penyakit secara signifikan lebih tinggi dalam akuarium daripada di gelas
atau cawan petri. Kepadatan Ikan mempunyai pengaruh yang signifikan
pada pemulihan. Pemulihan lebih tinggi (P <0,1) di gelas penuh dengan ikan 2,5 L) 1 dibandingkan dengan 40 ekor L) 1. Ikan terpengaruh sama pemulihan kepadatan dalam cawan Petri, dengan pemulihan lebih rendah di cawan yang diisi dengan 25 dan 75 ikan L) 1. Pemulihan lebih tinggi di cawan Petri (P <0,1), bahkan pada kepadatan ikan tinggi. Dalam perawatan, tingkat amonia lebih tinggi dalam gelas (8,3 mg L) 1 vs 4,3 mg L) 1 dalam gelas dan cawan Petri, tetapi lebih rendah kadar oksigen di
cawan Petri (5,9 mg L) 1 vs 8,3 mg L) 1.
Diskusi
Tetrahymena sp. diisolasi dari lesi kulit guppies alami yang terinfeksi, kultur in vitro dan digunakan dalam percobaan infeksi berikutnya. Parasit ini menyerang pada kulit ikan, pada sirip tidak menyebabkan infeksi sistemik. Untuk pengetahuan kami, tidak ada laporan infeksi oleh Tetrahymena pada ikan. Karakterisasi morfologi saja tidak cukup untuk mengidentifikasi spesies ini. Perbandingan dengan spesies lain dari Tetrahymena sangatlah sulit terutama disebabkan kurangnya fitur dan
rentang tumpang tindih dalam ukuran tubuh dan dalam jumlah baris silia. Namun, tidak adanya silia dapat mengesampingkan klasifikasi sebagai T. corlissi, yang patogen pada ikan (Hoffman, Landolt, Camper, Coats, Stookey & Burek 1975, Lom 1995, Shenberg 2003).
Tetrahymena sp berhasil menginnfeksi guppi, angelfish, platyfish dan neontetra, tapi tidak pada ikan nila. Kulit yang luka tidak mempengaruhi infeksi pada spesies ini. Neontetra, angelfish dan platyfish telah dilaporkan sebelumnya rentan terhadap pyriformis T. (Ponpornpisit et al. 2000) dan infeksi Tetrahymena telah dilaporkan dalam ikan zebra (Astrofsky et al 2002). Akan menarik untuk menguji kerentanan tambahan spesies, termasuk ikan dimakan, dan mungkin mengidentifikasi faktor-faktor yang memberikan proteksi dalam ketahanan ikan. Ikan mati merupakan sumber makanan yang baik untuk parasit, karena kami telah melakukan percobaan pada semua ikan yang mati, termasuk ikan yang tahan ketika hidup. Hal ini sejalan dengan yang dilaporkan saprophytic mengenai sifat parasit ini (Lom 1995). Kami melakukan pengamatan di peternakan ikan hias komersial dan rata-rata ikan terinfeksi karena luka pada kulit dan ini merupakan faktor utama penyebab ikan terinfeksi.
Dalam percobaan, Hoffman et al. (1975) dan Thompson (1958) gagal menginfeksi ikan non-luka dengan corlissi T. Sedangkan Ponpornpisit et al. (2000) berhasil membuat ikan terinfeksi setelah melukai kulit mereka dengan lokal aplikasi asam asetat 10% dan menyarankan bahwa kerusakan jaringan yang meluas ke dalam kulit, atau akibat stress merupakan faktor yang sangat penting dalam keberhasilan infeksi pada ikan. Hatai et al. (2001) melaporkan infeksi sukses di guppi berikut penghapusan beberapa skala dari tubuh mereka. Menariknya, dalam penelitian kami, luka oleh abrasi kulit tidak memiliki pengaruh yang signifikan terhadap infeksi. Mungkin luka yang ditimbulkan pada kulit tidak cukup dalam. Tetrahymena diklasifikasikan dalam subkelas Hymenostomatia dan Oligohymenophorea. Parama, Iglesias, Alvarez, Aja & Sanmartin (2003) menyarankan bahwa scuticociliates (Oligohymenophorea) dan hymenostomatids berkembang dalam lingkungan alam, khususnya di bawah sedimen yang kaya nutrisi, dan
menyebabkan infeksi saat ikan atau mengembangkan lesi
tunduk pada tekanan lingkungan.
Dalam studi ini, pengaruh berbagai factor infeksi dengan protozoa Tetrahymena sp akan di teliti. GBD peningkatan kerentanan terhadap infeksi. Dalam kasus ini, lesi kulit mikroskopik, yang telah melaporkan untuk diidentifikasi sebagai penyakit (Speare 1998), mungkin sebagai tempat masuk untuk parasit. Speare (1998) menyatakan bahwa ikan yang terkena dampak penyakit ini umumnya ikan memiliki keaktifan yang kurang, hal ini disebabkan karena stres atau kerusakan anatomis untuk
pada tubuh, seperti erosi epidermis pada gelembung gas yang melapisi dermal.
Kualitas air yang buruk, termasuk amonia dan bahan organik, dan suhu air rendah meningkatkan infeksi pada ikan. Bahan organik tinggi dan nutrisi tingkat tinggi dapat digunakan oleh parasit, sehingga meningkatnya infeksi di dalam air. Kondisi stres ikan dan akibatnya meningkatkan kerentanan untuk terinfeksi.
Guppi adalah ikan tropis, dengan optimal pemeliharaan suhu 25-27? C. Suhu air yang rendah diuji dalam penelitian ini (16-17 C), sedangkan yang lebih tinggi di uji dengan suhu (30-31 C). Suhu air rendah mungkin mengurangi protozoa Tetrahymena sp, (Hatai et al 2001). Tetapi stres yang terjadi pada ikan mungkin telah menjadi penyebab semakin tingginya infeksi yang terjadi pada ikan.
Ikan lebih rentan terhadap protozoa Tetrahymena sp. Hal ini disebabkan pada saat pengiriman ikan, ikan berada dalam keadaan ruangan yang gelap, hal ini merupakan resiko terjadinya infeksi pada saat pengiriman ikan. Pencahayaan yang cukup dalam simulasi pengiriman meningkatkan kerentanan ikan untuk terinfeksi oleh protozoa Tetrahymena sp. Terinfeksinya ikan terjadi karena kepadatan ikan tinggi, terakumulaasinya dengan oksigen murni, tingginya tekanan, akumulasi beban organik, penurunan pH disebabkan oleh akumulasi CO2 dan peningkatan pH yang sangat pesat saat membukan tempat pembaawa ikan, hal ini disebabkan oleh pelepasan CO2 (Lim, Dhert & Sorgeloos 2003), yang semuanya dapat memiliki efek negatif pada ikan.
Kondisi pada saat pengemasan dan transportasi ikan dapat menyebabkan stress berat, yang kemungkinan akan meningkatkan kerentanan ikan terhadap patogen (Barton & Iwama 1991). Iglesias, Parama, Alvarez, Leiro, Fernandez & Sanmartin (2001) menunjukkan bahwa lesi kecil yang disebabkan oleh paparan saturasi oksigen ikan super-mempengaruhi penyakit yang disebabkan oleh scuticociliates. Seperti lesi
yang mungkin disebabkan oleh kadar oksigen yang tinggi
dalam pengiriman (14,4 mg L) 1), mungkin mempengaruhi
infeksi.
Penyembuhan penyakit juga dipelajari. Stok ikan yang terinfeksi dengan 7-L akuarium pada kepadatan rendah (2,9 ikan L) 1) menyebabkan pemulihan penuh. Meskipun tinggi kepadatan penebaran berdampak negatif pada pemulihan ikan, tidak jelas apakah ini karena kepadatan tinggi per kolam atau seiring dengan penurunan kualitas air. Mengurangi pemulihan ikan dalam cawan Petri mungkin disebabkan oleh
hubungan ke tingkat oksigen yang lebih rendah dan atau terganggu
kemampuan untuk bergerak. Banyak protozo berbulu mata, seperti Tetrahymenasp. Protozoa ini dapat menjadi indikator stress di lingkungan perairan, karena mereka dapat menahan tingkat oksigen terlarut yang rendah dan kandungan bahan organik yang tinggi (Bharati, Khan, Kalavati & Ramam 2001). Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa lingkungan yang buruk dan kondisi fisiologis memiliki efek mendalam pada
infeksi yang disebabkan oleh Tetrahymena sp. Praktek manajemen, seperti menghapus ikan mati, mengoptimalkan kualitas air dan kondisi budidaya, penebaran dengan kepadatan rendah dan umumnya menghindari stres akan mengurangi risiko infeksi dan meningkatkan pemulihan.
Ucapan Terima Kasih.
Kami berterima kasih kepada Prof Ilan Paperna dari Universitas Ibrani Yerusalem untuk saran ahli tentang tetrahymenosis. Kami juga mengucapkan terima kasih kepada Bapak Ran Epstein dari Petambak Colors, Bapak Saul Harel dari Petambak Negev Angels dan Bapak Guy Kaplan dari Petambak Sundag untuk menyediakan jenis ikan hias, dan Bapak Shemaya Toledano dari Petambak Ikan Laut Mati untuk ikan yang
digunakan dalam percobaan kami. Penelitian ini didukung oleh Arava Penelitian Tengah dan Utara, Hilda Blaustein Foundation dan Beasiswa Rotem Endowment Fund.
REFERENSI
APHA (1995) Standard Methods for the Examination of Water
and Wastewater (ed. by A.D. Eaton, L.S. Clesceri & A.E.
Greenberg), pp. 2-08–5-15. American Public Health Association,Washington, DC.
Astrofsky K.M., Schech J.M., Sheppard B.J., Obenschain C.A.,
Chin A.M., Kacergis M.C., Laver E.R., Bartholomew J.L. &
Fox J.G. (2002) High mortality due to Tetrahymena sp.
infection in laboratory maintained zebrafish (Brachydanio
rerio). Comparative Medicine 52, 363–367.
Barton B.A. & Iwama G.K. (1991) Physiological changes in fish
from stress in aquaculture with emphasis on the response and
effects of corticosteroids. Annual Review of Fish Diseases 1, 3–26.
Bharati V.R., Khan R.N., Kalavati C. & Ramam A.V. (2001)
Protozoan colonization on artificial substrates in relation to
water quality in a tropical Indian harbour. Journal of
Environmental Sciences 13, 143–147.
Botes H., Basson L. & Van As L.L. (2001) Two new species of
Mantoscyphidia jankowski, 1980 (Ciliophora: Peritrichia), gill
symbionts of Haliotis Linnaeus, 1758 (Mollusca: Archaeogastropoda)
from the South coast of South Africa. Acta
Protozoologica 40, 131–140.
Ferguson H.W., Hicks B.D., Lynn D.H., Ostland V.E. & Bailey
J. (1987) Cranial ulceration in Atlantic salmon Salmon salar
associated with Tetrahymena sp. Diseases of Aquatic Organisms
2, 191–195.
Foissner W. (1991) Basic light and scanning electron microscope
methods for taxonomic studies of ciliated protozoa. European
Journal of Protistology 27, 313–330.
Hatai K., Chukanhom K., Lawhavinit O., Hanjavanit C.,
Kunitsune M. & Imai S. (2001) Some biological characteristics
of Tetrahymena corlissi isolated from guppy in Thailand.
Fish Pathology 36, 195–199.
Hoffman G.L., Landolt M., Camper J.E., Coats D.W., Stookey
J.L. & Burek J.D. (1975) A disease of freshwater fishes caused
by Tetrahymena corlissi Thompson, 1955, and a key for
identification of holotrich ciliates of freshwater fishes. The
Journal of Parasitology 61, 217–223.
Iglesias R., Parama A., Alvarez J.L., Leiro J., Fernandez J. &
Sanmartin M.L. (2001) Philasterides dicentrarchi (Ciliophora,
Scuticociliatida) as the causative agent of scuticociliatosis in
farmed turbot (Scophthalmus maximus) in Galicia (NW
Spain). Diseases of Aquatic Organisms 46, 47–55.
Imai S., Tsurimaki S., Goto E., Wakita K. & Hatai K. (2000)
Tetrahymena infections in guppies Poecilia reticulata. Fish
Pathology 35, 67–72.
Lim L.C., Dhert P. & Sorgeloos P. (2003) Recent developments
and improvements in ornamental fish packaging systems for
air transport. Aquaculture Research 34, 923–935.
Lom J. (1995) Trichodinidae and other ciliates (Phylum
ciliophora) In: Fish Diseases and Disorders: Protozoan and
metazoan infections (ed. by P.T.K Woo), pp. 229–262. CABI
Publishing, New York.
Loo J.J., Ling K.H. & Lim L.C. (1998) Development of an
improved treatment protocol for quality enhancement of
guppy prior to export. Singapore Journal of Primary Industries
26, 15–20.
Parama A., Iglesias R., Alvarez J.L., Aja C. & Sanmartin M.L.
(2003) Philasterides dicentrarchi (Ciliophora, Scuticociliatida):
experimental infection and possible routes of entry in
farmed turbot (Scophthalmus maximus). Aquaculture 217,
73–80.
Ponpornpisit A., Endo M. & Murata H. (2000) Experimental
infections of a ciliate Tetrahymena pyriformis on ornamental
fishes. Fisheries Science 66, 1026–1031.
Ponpornpisit A., Endo M. & Murata H. (2001) Prophylactic
effects of chemicals and immunostimulants in experimental
Tetrahymena infections of guppy. Fish Pathology 36, 1–6.
Shenberg S. (2003) Histopathology of the Ciliate Tetrahymena
corlissi Infection in Guppy Poecilia reticulata. MSc thesis, The
Hebrew University of Jerusalem, Rehovot.
Speare D.J. (1998) Disorders associated with exposure to excess
dissolved gases. In: Fish Diseases and Disorders: Non-Infectious
Disorders (ed. by P.T.K. Woo & J.F. Leatherland), pp. 207–
224. CABI Publishing, New York.
Thompson J.C. Jr (1958) Experimental infections of various
animals with strains of the genus Tetrahymena. Journal of
Protozoology 5, 203–205.
Received: 21 March 2005
Revision received: 21 July 2005
Accepted: 21 July 2005
547
_ 2005
Blackwell Publishing Ltd
Journal of Fish Diseases 2005, 28, 539–547 M Pimenta Leibowitz et al. Tetrahymena sp. infection in guppies
LINGKUNGAN DAN KONDISI FISIOLOGIS YANG MEMPENGARUHI TETRAHYMENA SP. INFEKSI PADA GUPPIES, POECILIA RETICULATE PETERS
(TUGAS PARASIT DAN PENYAKIT ORGANISME AIR)
OLEH :
Alwan Tholifin 0814111024
Tri Agustina 0814111063
Tutut Yuniarsih 0714111..…
PROGRAM STUDY BUDIDAYA PERAIRAN
FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS LAMPUNG
2010
